Meta tags:
Headings (most frequently used words):
bloga, stycznia, czwartek, posty, pisane, labu, wtorek, 12, 2016, 15, 2015, 13, listopada, 2014, partner, tematycznie, scienceowate, blogi, inne, czytane, dla, frajdy, linki, branżowe, obserwatorzy, popularne, archiwum, oświadczenie, autora, łączna, liczba, wyświetleń, powrót, izolacja, rna, in, depth, faq, lat,
Text of the page (most frequently used words):
nie (31), rna (22), się (19), jest (18), bloga (12), blog (11), więc (8), jeśli (7), izolacji (7), czy (6), #stycznia (6), ale (6), można (6), tego (5), mnie (5), też (5), tam (5), lepiej (5), ten (5), dna (5), przez (4), tym (4), być (4), lat (4), czas (4), żeby (4), inne (4), dla (4), nic (4), takie (4), jak (4), tak (4), już (4), potem (4), autora (3), mogą (3), listopada (3), 2015 (3), powrót (3), dalej (3), był (3), ile (3), informacji (3), sumie (3), posty (3), nauka (3), autor (3), przelewa (3), krew (3), dlatego (3), mam (3), kiedyś (3), rzeczy (3), nas (3), która (3), przypadku (3), jeszcze (3), bardzo (3), próbówki (3), tylko (3), lub (3), trizolu (3), zwykle (3), izotiocyjanianu (3), etap (3), nawet (3), fazy (3), resztki (3), niż (3), dodajemy (3), nam (3), labu (3), żadnej (2), bez (2), 2014 (2), 2016 (2), mija (2), odkąd (2), utworzyłam (2), fajny (2), żywiołowego (2), rozwoju (2), byłam (2), wulkanem (2), ambicji (2), radości (2), powodu (2), podjęcia (2), nowej (2), ech (2), dojrzałam (2), decyzji (2), częściowo (2), odżył (2), żebym (2), ciągnęłą (2), zlabu (2), rozentuzjazmowanej (2), zastanowiło (2), osób (2), wpada (2), szukając (2), czyżby (2), moda (2), analizy (2), transkryptomu (2), izolacja (2), depth (2), faq (2), dolina (2), biotechnologiczna (2), mikroby (2), będąc (2), coś (2), źle (2), prof (2), medyczna (2), metodyka (2), komentarzy (2), pracy (2), czym (2), pisać (2), życie (2), poza (2), robić (2), pół (2), kilka (2), molekularnie (2), com (2), czwartek (2), komentarze (2), których (2), tych (2), które (2), raczej (2), jednak (2), woda (2), najczęściej (2), depc (2), przy (2), itp (2), tyle (2), obecnie (2), chomczyńskiego (2), roślin (2), trizol (2), świeżych (2), czasem (2), zależy (2), tkanki (2), komórek (2), szybko (2), białka (2), rnazy (2), wasze (2), a260 (2), 230 (2), poniżej (2), absorbancji (2), dość (2), zamrażarce (2), chloroformu (2), organicznej (2), interfazy (2), próbówek (2), jeżeli (2), albo (2), zebrać (2), przesadzić (2), powtórzyć (2), sobie (2), wstrząśnięciu (2), sie (2), będzie (2), gdy (2), pipetą (2), trzymać (2), etanolu (2), także (2), osad (2), pod (2), wsio (2), rozpuścić (2), stężenie (2), termobloku (2), chcecie (2), roku (2), było (2), zaczynam (2), mój (2), część (2), znów (2), pisane (2), motyw, prosty, obsługiwane, usługę, blogger, łączna, liczba, wyświetleń, treści, prezentowane, blogu, prywatnymi, opiniami, przemyśleniami, reprezentuje, swoich, notkach, interesów, jednostki, zamyśle, notki, blogowe, mają, celu, godzenia, interesy, jakiejkolwiek, instytucji, osoby, zgodnie, prawem, autorskim, fragmenty, tekstu, kopiowane, zgody, podoba, podlinkuj, siebie, oświadczenie, archiwum, studen, jedn, popularne, obserwatorzy, ziarnicy, przeszczepach, hamatoonkologii, naukowi, kasia, rak, sużba, zdrowia, polecam, diagnostyczne, info, antyrakowy, dekalog, krauzego, linki, branżowe, koszmary, architektury, opowieści, warszawy, kaś, myśl, arcydzieła, cukiernicze, sushifaza, czytane, frajdy, bromek, świeci, diagnostyka, laboratoryjna, webcri, szpitalnie, sykofanta, bioinformatyk, ztrewq, biotechnologii, polotem, prostrzego, rafała, wi3dzia, bart, młodym, fizykiem, baśń, dziedziny, chemii, doktoranta, kiedy, labie, idzie, eng, prążki, komiksowo, lablit, sztuka, bakteryjna, sorokowski, modelowanie, molekularne, jakuba, milczarka, biotechnoblogia, okiem, profesora, piękno, neurobiologii, hematologii, matematycznie, krakowa, vita, silica, analityka, suplementach, diety, czajniczek, pana, russela, mykologia, pathologystudent, młodą, lekarką, mikrą, pan, brat, scienceowate, blogi, tematycznie, partner, subskrybuj, atom, strona, główna, fajnej, latach, trochę, przygasłam, prostu, wciągnęło, siecią, zwykłe, codzienne, oraz, lubię, gwizdka, zamykam, postów, powróci, blogspot, pewno, post, przeczytania, gdzieś, blogosferze, naukowej, dzięki, czytaliście, etykiety, jedna, niewielu, znam, opiszę, studencku, detalach, jako, uczyli, celem, każdej, wyodrębnienie, mrowia, cząsteczek, interesują, wysłanie, reszty, śmieciem, wpizdu, nigdy, proces, jednoetapowy, obieranie, cebuli, warstwa, warstwie, pewna, przeszkoda, ono, podatne, degradację, rnazami, słyną, swej, wytrzymałości, dziwnego, bronią, przed, inwazją, niepożądanej, spoza, ustroju, potrafią, wrzodem, środki, obronne, wolna, rnaz, tzw, przepis, samodzielną, derna, tyzację, zapraszam, rękawiczki, chuchać, pluć, czesać, otwartych, eppendorfach, itd, niektóre, laby, popadają, paranoję, słysząc, rnazach, pracowałam, miejscu, którym, istniał, kąt, gdzie, mogło, stać, blaty, odkażało, godziny, materiałem, mogły, wyciągane, lodu, ani, moment, kwiatki, apeluję, rozsądek, robi, metodą, trizolową, kolumienkową, chociaż, podobno, wariaci, którzy, korzystają, chlorku, cezu, ciekawości, zajrzeć, wczuć, klimat, chyba, izolacje, wyjątkowo, zacukrzonych, zagumowanych, zmuszają, człowieka, godzinnego, wirowania, ultrawirówce, nawiasem, mówiąc, upierdliwość, powyższej, metody, była, bodźcem, znalezienia, lepszego, sposobu, narodził, potężna, miesznka, lizująca, powinni, jej, używać, kręceniu, horrorów, sądzę, rozpływające, wielkiej, kadzi, ciało, byłoby, widokiem, koneserów, wróć, miałam, najlepiej, użyć, tkanek, degraduje, tkanka, świeższa, należy, zhomogenizować, jakim, sposobem, krwią, szpikiem, kulturą, zawiesinową, najłatwiej, drobne, skrawki, pellety, zawiesza, 1ml, czeka, upłynnienie, zawartości, mieszanina, głównie, fenolu, izoamylu, guanidyny, reszta, tajemnica, producenta, służy, wprowadzeniu, chaosu, błony, białkowo, lipidowe, izotiocyjanian, mocna, sól, chaotropowa, destabilizuje, zarówno, oddziaływania, między, jaki, wewnątrzkomórkowe, skutecznie, denaturuje, upiorne, momentu, włacznie, całkowicie, bezpieczne, musicie, wiedzieć, ciemnej, stronie, jego, małe, ilości, aktywne, względem, wszelkich, białek, raz, uwaga, łapki, dwa, każde, zanieczyszczenie, izotiocyjanianem, końcowym, etapie, zniszczy, polimerazy, odwrotne, transkryptazy, restryktazy, azy, dodacie, miarą, zanieczyszczenia, chaotropami, niski, stosunek, ideał, pojedyncza, górka, lewej, strony, wykresie, orazek, czystego, tizolu, długo, przechowywać, kolejny, krok, dodanie, 200ul, ekstrakcja, chloroformem, pozwala, oddzielenie, wodnej, śmieciowej, ciała, smutne, większość, zvortexowaniu, zwirowaniu, protokołu, przenosimy, fazę, wodną, zasiorbiemy, frakcji, bądź, otrzymamy, zabiałczoną, próbkę, zamiast, mocno, zawyżona, stosunku, faktycznej, wartość, końca, dużą, zawartością, polifenoli, cukrów, chloroformowy, uniknąć, darować, ważne, dodaniu, poczekajmy, rozdzielą, dopiero, rozwarstwione, wkładajmy, wirówki, interfaza, bardziej, zbita, razu, zaczniemy, wirować, zebraliśmy, następnie, 5ml, izopropanolu, alkohole, osuszają, środowisko, wokół, kwasów, nukleinowych, strącając, roztworu, generalnie, chodzi, początku, roztworze, strąci, kłaczek, mamy, możemy, spróbować, całego, pozbedziemy, kłaczka, czekamy, chwilę, roztwór, lekko, zmętnieje, wirujemy, wirowaniu, powinniśmy, otrzymać, bielutki, pellecik, dole, probowki, kleisty, zwięzły, powinien, próbowki, precypitat, zlewamy, uważając, wylać, dziecka, kąpielą, alkoholu, zbieramy, przepłukać, nasz, cenny, kwasik, powtarzamy, akcję, wirowaniem, wolniejszych, obrotach, zlewaniem, odsysaniem, resztek, czujemy, poprawia, dziesiętnych, suszymy, próżniowo, nawiewem, termicznie, ryba, byle, napluć, nakichać, potencjalnie, zadziałać, stanie, przezroczysty, oderwie, suszenia, trudno, osadu, wody, czuja, jakie, potrzebne, rozpuszczamy, max, min, lodzie, jakąś, godzinkę, mierzymy, porady, niech, wam, wpadnie, głowy, buforze, jonami, mg2, prowadzicie, reakcji, enzymatycznej, jony, szatkują, dłużej, wytrzyma, temp, pokojowej, trzymanie, stopniach, ponad, godzinę, może, zrobić, kuku, przesady, temperatura, pokojowa, zabije, podobnie, krótkie, wygrzewanie, lodówce, zostawiać, overnight, overweekend, overweek, rozmrażanie, zamrażanie, dziesiątki, razy, pobrać, mikrolitr, stocku, głupie, składować, powyżej, zróbcie, niego, cdna, koniecznie, później, wykorzystać, zadbajcie, najczystsze, przechowywane, starzeje, dosyć, szczególnie, wodzie, lepszy, bufor, znajdziecie, protokół, dołączany, invitrogenu, link, labrata, studentki, okrzepła, obronie, dyplomu, znalezieniu, marzeń, pewne, zmieniły, niedługo, obronię, doktorat, specjalizację, synka, walczę, zmęczeniem, fizycznym, psychicznym, nieprzespanymi, nocami, próbuję, jakoś, wpasować, pracę, zawodową, niezliczone, sprawy, obecny, harmongram, wiecie, życiu, dobrze, takiej, którą, chciałabym, zatrzeć, wymazać, jedno, postanowiłam, pociągnę, oficjalny, tekstów, stąd, przeniosę, ukrytych, jakby, nowa, będę, pisywać, wróci, rubryka, humor, powinnam, związać, jakimś, portalem, branżowym, chcę, żadna, reklama, firm, produktów, projekt, zbiorowy, dziękuję, wszystkim, czytelnikom, dotychczasowe, czytanie, nadzieję, drugi, komuś, spodoba, http, wordpress, wtorek,
Text of the page (random words):
pisane z labu pisane z labu wtorek 12 stycznia 2016 powrót bloga ech dojrzałam do decyzji żeby blog częściowo odżył nie to żebym dalej ciągnęłą zlabu to był blog rozentuzjazmowanej studentki która jeszcze nie okrzepła po obronie dyplomu i znalezieniu pracy marzeń pewne rzeczy się zmieniły bo takie jest życie niedługo obronię doktorat zaczynam specjalizację mam synka walczę ze zmęczeniem fizycznym i psychicznym nieprzespanymi nocami próbuję jakoś wpasować pracę zawodową i niezliczone inne sprawy w mój obecny harmongram i wiecie co jest mi w życiu na tyle dobrze że nie było takiej rzeczy w 2015 roku którą chciałabym zatrzeć czy wymazać ale jedno sobie postanowiłam pociągnę mój oficjalny blog http molekularnie wordpress com część tekstów stąd tam też przeniosę także tych obecnie ukrytych więc tak jakby zaczynam od nowa no i będę znów pisywać wróci też rubryka humor z labu ps był komentarze że powinnam związać się znów z jakimś portalem branżowym nie chcę ten blog to część mnie żadna reklama firm i produktów i nie projekt zbiorowy dziękuję wszystkim czytelnikom za dotychczasowe czytanie i mam nadzieję że ten drugi blog też się komuś spodoba autor em co przelewa krew o 19 55 5 komentarzy czwartek 15 stycznia 2015 izolacja rna in depth faq zastanowiło mnie to ile osób wpada na bloga szukając informacji o izolacji rna czyżby moda na analizy transkryptomu w sumie jest to jedna z niewielu rzeczy na których się znam więc opiszę to po studencku w detalach jako i mnie kiedyś uczyli celem każdej izolacji jest wyodrębnienie z mrowia cząsteczek tych które nas interesują i wysłanie reszty która dla nas jest śmieciem wpizdu nie jest to nigdy proces jednoetapowy raczej coś jak obieranie cebuli warstwa po warstwie w przypadku rna jest jeszcze pewna przeszkoda jest ono bardzo podatne na degradację rnazami które słyną ze swej wytrzymałości w sumie nic dziwnego bronią nas przed inwazją niepożądanej informacji spoza ustroju tu jednak potrafią być wrzodem na de a więc środki obronne woda wolna od rnaz najczęściej tzw woda depc po przepis na samodzielną derna tyzację zapraszam np na labrata poza tym rękawiczki nie chuchać i nie pluć do próbówki nie czesać się przy otwartych eppendorfach itp itd i to tyle niektóre laby popadają w paranoję słysząc o rnazach pracowałam kiedyś w miejscu w którym istniał kąt tylko do izolacji rna gdzie nie mogło nic stać blaty odkażało się co pół godziny próbówki z materiałem nie mogły być wyciągane z lodu ani na moment takie tam kwiatki apeluję więc o rozsądek jak więc się to robi obecnie najczęściej metodą chomczyńskiego trizolową lub kolumienkową chociaż są podobno wariaci którzy dalej korzystają z chlorku cezu z ciekawości można zajrzeć pod ten link żeby wczuć się w klimat ale chyba tylko izolacje z wyjątkowo zacukrzonych i zagumowanych roślin zmuszają człowieka do 20 godzinnego wirowania w ultrawirówce nawiasem mówiąc upierdliwość powyższej metody była bodźcem dla prof chomczyńskiego do znalezienia lepszego sposobu i tak narodził się trizol jest to potężna miesznka lizująca powinni jej używać przy kręceniu horrorów sądzę że rozpływające się w wielkiej kadzi trizolu ciało byłoby widokiem dla koneserów wróć nie o tym miałam pisać do izolacji najlepiej użyć świeżych tkanek rna z czasem degraduje więc im tkanka świeższa tym lepiej należy ją zhomogenizować tu już zależy od tkanki jakim sposobem z krwią szpikiem kulturą zawiesinową jest najłatwiej drobne skrawki tkanki pellety z komórek zawiesza się w trizolu zwykle 1ml i czeka się na upłynnienie zawartości trizol to mieszanina głównie fenolu izoamylu i izotiocyjanianu guanidyny reszta to tajemnica producenta ten etap służy wprowadzeniu chaosu w błony białkowo lipidowe izotiocyjanian to mocna sól chaotropowa która szybko destabilizuje zarówno oddziaływania między jaki i wewnątrzkomórkowe i bardzo skutecznie denaturuje białka nawet upiorne rnazy a więc do tego momentu włacznie rna jest całkowicie bezpieczne musicie jednak wiedzieć o ciemnej stronie izotiocyjanianu nawet jego małe ilości są bardzo aktywne względem wszelkich białek więc raz uwaga na wasze łapki dwa każde zanieczyszczenie rna izotiocyjanianem na końcowym etapie izolacji zniszczy wasze polimerazy odwrotne transkryptazy restryktazy i inne azy których potem dodacie do rna miarą zanieczyszczenia rna chaotropami jest niski stosunek a260 230 poniżej 1 4 jest już raczej źle ideał to 1 95 2 25 i pojedyncza górka z lewej strony na wykresie absorbancji orazek czystego rna poniżej w tizolu rna można dość długo przechowywać w zamrażarce kolejny krok to dodanie chloroformu zwykle 200ul ekstrakcja chloroformem pozwala na oddzielenie fazy wodnej z rna od organicznej fazy śmieciowej ciała komórek białka i inne smutne resztki i interfazy większość dna po zvortexowaniu i zwirowaniu wg protokołu przenosimy fazę wodną do świeżych próbówek jeżeli zasiorbiemy tu frakcji organicznej bądź interfazy otrzymamy albo zabiałczoną próbkę albo dna zamiast rna mocno zawyżona w stosunku do faktycznej wartość absorbancji lepiej nie zebrać do końca niż przesadzić w przypadku roślin z dużą zawartością polifenoli cukrów itp można etap chloroformowy powtórzyć ale jeśli można tego uniknąć to lepiej sobie darować ważne po dodaniu chloroformu i wstrząśnięciu poczekajmy aż fazy sie rozdzielą i dopiero tak rozwarstwione wkładajmy do wirówki interfaza będzie bardziej zbita niż w przypadku gdy od razu po wstrząśnięciu zaczniemy wirować do tego co zebraliśmy dodajemy następnie 0 5ml izopropanolu alkohole osuszają środowisko wokół kwasów nukleinowych strącając je z roztworu a o to nam generalnie chodzi od początku jeżeli w roztworze strąci nam się kłaczek to mamy tam dna możemy spróbować zebrać ile się da pipetą ale całego się nie pozbedziemy jeśli kłaczka nie ma czekamy chwilę aż roztwór lekko zmętnieje po czym wirujemy po wirowaniu powinniśmy otrzymać bielutki pellecik na dole probowki jest on dość kleisty i zwięzły powinien trzymać się dna próbowki precypitat zlewamy uważając by nie wylać dziecka z kąpielą resztki alkoholu zbieramy pipetą dodajemy etanolu 75 by przepłukać nasz cenny kwasik potem powtarzamy akcję z wirowaniem tylko na wolniejszych obrotach ze zlewaniem i odsysaniem resztek etanolu ten etap także można powtórzyć jeśli czujemy że mogą być tam resztki izotiocyjanianu zwykle poprawia to o kilka dziesiętnych a260 230 osad suszymy czy to próżniowo czy pod nawiewem czy to termicznie wsio ryba byle to robić tak by nie napluć i nie nakichać do próbówek tu już rnazy mogą potencjalnie zadziałać osad można rozpuścić gdy stanie sie przezroczysty lub oderwie się od dna próbówki lepiej nie przesadzić z czasem suszenia bo potem trudno będzie go rozpuścić do osadu dodajemy wody depc na czuja zależy jakie stężenie jest nam potrzebne rozpuszczamy na termobloku przez max 10 min lub na lodzie przez jakąś godzinkę potem mierzymy stężenie i wsio tu znajdziecie protokół dołączany do trizolu invitrogenu i jeszcze takie tam porady niech wam nie wpadnie do głowy trzymać rna w buforze z jonami mg2 jeśli nie prowadzicie żadnej reakcji enzymatycznej jony 2 szatkują rna rna dłużej wytrzyma w zamrażarce niż w temp pokojowej a trzymanie na termobloku w 60 stopniach ponad godzinę może zrobić mu kuku ale też bez przesady temperatura pokojowa przez 2 3h go nie zabije podobnie jak krótkie wygrzewanie rna lepiej w lodówce nie zostawiać overnight overweekend czy overweek rozmrażanie i zamrażanie dziesiątki razy żeby pobrać mikrolitr ze stocku jest głupie jeśli chcecie składować rna powyżej roku zróbcie z niego cdna a jeśli już koniecznie chcecie je później wykorzystać to zadbajcie by było jak najczystsze nawet przechowywane w 80 rna starzeje się dosyć szybko szczególnie w wodzie lepszy jest bufor np eb autor em co przelewa krew o 10 50 22 komentarze etykiety metodyka czwartek 13 listopada 2014 5 lat bloga mija 5 lat odkąd utworzyłam tego bloga fajny czas czas żywiołowego rozwoju byłam wulkanem ambicji i radości z powodu podjęcia nowej fajnej pracy po 5 latach trochę przygasłam ale nie dlatego że nie mam o czym pisać po prostu wciągnęło mnie życie poza siecią takie zwykłe codzienne dlatego oraz dlatego że nie lubię robić nic na pół gwizdka zamykam bloga kilka postów powróci na molekularnie blogspot com na pewno post o izolacji rna do przeczytania gdzieś kiedyś w blogosferze naukowej dzięki że czytaliście autor em co przelewa krew o 09 53 9 komentarzy strona główna subskrybuj posty atom partner bloga dolina biotechnologiczna posty tematycznie metodyka 1 scienceowate blogi z mikrą za pan brat będąc młodą lekarką pathologystudent mykologia medyczna czajniczek pana russela o suplementach diety analityka medyczna vita in silica z krakowa matematycznie prof hematologii piękno neurobiologii okiem profesora biotechnoblogia blog jakuba milczarka modelowanie molekularne mikroby 2 sorokowski blog sztuka bakteryjna lablit nauka w prążki komiksowo kiedy coś w labie idzie źle eng doktoranta blog baśń z dziedziny chemii będąc młodym fizykiem bart wi3dzia i nauka nic prostrzego wg rafała o biotechnologii z polotem ztrewq bioinformatyk eu sykofanta też szpitalnie nauka webcri diagnostyka laboratoryjna mikroby bromek świeci inne czytane dla frajdy sushifaza arcydzieła cukiernicze kaś nie myśl opowieści z warszawy koszmary architektury linki branżowe antyrakowy dekalog krauzego diagnostyczne info dolina biotechnologiczna polecam kasia vs rak sużba zdrowia naukowi pl o ziarnicy przeszczepach hamatoonkologii obserwatorzy popularne posty izolacja rna in depth faq zastanowiło mnie to ile osób wpada na bloga szukając informacji o izolacji rna czyżby moda na analizy transkryptomu w sumie jest to jedn powrót bloga ech dojrzałam do decyzji żeby blog częściowo odżył nie to żebym dalej ciągnęłą zlabu to był blog rozentuzjazmowanej studen 5 lat bloga mija 5 lat odkąd utworzyłam tego bloga fajny czas czas żywiołowego rozwoju byłam wulkanem ambicji i radości z powodu podjęcia nowej archiwum bloga 2016 1 10 stycznia 17 stycznia 1 powrót bloga 2015 1 11 stycznia 18 stycznia 1 2014 1 9 listopada 16 listopada 1 oświadczenie autora treści prezentowane w tym blogu są prywatnymi opiniami i przemyśleniami autora nie reprezentuje on w swoich notkach interesów żadnej jednostki w zamyśle notki blogowe nie mają na celu godzenia w interesy jakiejkolwiek instytucji czy osoby zgodnie z prawem autorskim fragmenty tekstu nie mogą być kopiowane bez zgody autora jeśli blog ci się podoba podlinkuj go u siebie łączna liczba wyświetleń motyw prosty obsługiwane przez usługę blogger
|